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人流行性腮腺炎(EP)ELISAKit試劑盒/測試盒說明書

    人流行性腮腺炎(EP)ELISA試劑盒

人流行性腮腺炎(EP)ELISAKit試劑盒/測試盒

    詳細信息

    貨號:YZY-E565

    品牌:原鑫生物

    數(shù)量:大量

    供應(yīng)商:上海源鑫生物科技有限公司

    檢測限:參考說明書

    檢測方法:ELISA

    應(yīng)用:定性/定量

    適應(yīng)物種:人

    樣本:血清、血漿、細胞上清液、組織勻漿

    規(guī)格:48T/96T

    人流行性腮腺炎(EP)ELISA試劑盒使用說明書

    英文名稱:Humanepidemicparotitis,EPELISAKit

    本試劑盒只能用于科學(xué)研究,不得用于醫(yī)學(xué)診斷,具體各指標(biāo)使用說明書請聯(lián)系客服索取,本模板為通用模板,僅供參考。

    試劑盒檢測原理:

    人流行性腮腺炎(EP)ELISA試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被樣本抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并徹底洗滌。

    用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的樣本呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。

    樣品收集、處理及保存方法:

    1.血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

    2.血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。

    3.細胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

    4.組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。

    5.保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

    自備物品:

    1.酶標(biāo)儀(450nm)

    2.高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

    3.37℃恒溫箱

    操作注意事項:

    1.試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶,這屬于正常現(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再使用。

    2.實驗中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。

    3.濃度為0的S0號標(biāo)準(zhǔn)品即可視為陰性對照或者空白;按照說明書操作時樣本已經(jīng)稀釋5倍,最終結(jié)果乘以5才是樣本實際濃度。

    4.嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時間、加液量及順序進行溫育操作。

    5.所有液體組分使用前充分搖勻。

    人流行性腮腺炎(EP)ELISA試劑盒組成:

    試劑的準(zhǔn)備:

    20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。

    洗板方法:

    1.手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次。

    2.自動洗板機:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。

    人流行性腮腺炎(EP)ELISA試劑盒操作步驟:

    1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

    2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;

    3.樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。

    4.除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

    5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機洗板)。

    6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

    7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。

    結(jié)果判斷

    繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線:在Excel工作表中,以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo),對應(yīng)OD值作縱坐標(biāo),繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。


   研發(fā)、生產(chǎn)科研產(chǎn)品:

    ELISA試劑盒:多種屬、1000多種指標(biāo):人、大小鼠、通用、牛、兔、山羊、倉鼠、豬、馬、雞、犬、豚鼠、猴、綿羊

    抗體:兔多抗、鼠單抗種類豐富,一抗1萬余種,二抗100多種;

    重組蛋白:多項發(fā)明專利,原核表達系統(tǒng)穩(wěn)定表達蛋白1000余種。

    在線聯(lián)系:(周經(jīng)理) 17621047120QQ:2441609688(任經(jīng)理)

    官方電話: 400-788-2680

    更多elisa試劑盒:http://m.meiweixing.cn/product-32-1-1.html

 

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