丙酮酸（PA）含量檢測試劑盒 Pyruvic Acid (PA) Content Assay Kit 
丙酮酸含量檢測試劑盒說明書產(chǎn)品描述：
丙酮酸（Pyruvic Acid）是生物代謝及物質(zhì)轉(zhuǎn)化的重要中間體，可通過乙醛 CoA 和三羧酸循環(huán)實
現(xiàn)體內(nèi)糖、脂肪和氨基酸間的相互轉(zhuǎn)化，在營養(yǎng)物質(zhì)代謝過程中起著重要的樞紐作用。丙酮酸分子中
同時具有羰基和羧基兩個官能團，除具有羧酸和酮的性質(zhì)外，還具有 α-酮酸的性質(zhì)，作為一種基本化
工原料在化學(xué)、制藥、食品、農(nóng)業(yè)及環(huán)保等領(lǐng)域具有廣泛應(yīng)用。
丙酮酸能夠與 2,4-二硝基苯肼反應(yīng)生成丙酮酸-2,4-二硝基苯腙，在堿性溶液中進一步被氧化為棕
紅色物質(zhì)，產(chǎn)物在 520 nm 處具有特征吸收峰，通過吸光值的變化即可定量檢測丙酮酸的含量。
丙酮酸含量檢測試劑盒說明書產(chǎn)品內(nèi)容圖示： 
丙酮酸含量檢測試劑盒說明書產(chǎn)品使用說明： 測定過程中所需要的儀器和試劑：可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96 孔板、研缽/勻漿
器、可調(diào)式移液器、臺式離心機和蒸餾水。 ①組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積（mL）為 1：（5-10）的比例（建議稱取 0.1 g 組織，加
入 1 mL 提取液）處理樣品，冰浴勻漿，室溫靜置 30 min，8000 g 常溫離心 10 min，取上清待測。 ②細(xì)菌或細(xì)胞：離心收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104 個）：提取液體積（mL）
為（500-1000）：1 的比例（建議 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1 mL 提取液）處理樣品，冰浴超聲破碎（功
率 20%，超聲 3 s，間隔 10 s，重復(fù) 30 次），室溫靜置 30 min，8000 g 常溫離心 10 min，取上清待測。 ③血清（漿）、培養(yǎng)液等液體樣本：按照樣本體積（mL）：提取液體積（mL）為 1：（5-10）的比
例（建議 0.1 mL 液體樣本加入 1 mL 提取液）處理樣本，充分混勻后室溫靜置 30 min，8000 g 常溫離
心 10 min，取上清待測。
丙酮酸含量檢測試劑盒說明書測定步驟說明:
①分光光度計/酶標(biāo)儀預(yù)熱 30 min 以上，調(diào)節(jié)波長至 520 nm，蒸餾水調(diào)零。 ②在 96 孔板或微量玻璃比色皿中依次加入下列試劑。 
吸光值測定：測定 520 nm 處吸光值，記為 A 測定、A 標(biāo)準(zhǔn)和 A 空白，計算?A 測定=A 測定-A
空白，?A 標(biāo)準(zhǔn)=A 標(biāo)準(zhǔn)-A 空白。注：空白組只需測定 1-2 次。
標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立：以 100、50、25、12.5、6.25、3.125 μg/mL 為橫坐標(biāo)（x），以其對應(yīng)的?A 標(biāo)準(zhǔn)
為縱坐標(biāo)（y），繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到標(biāo)準(zhǔn)方程 y=kx+b，將?A 測定帶入公式中得到 x（μg/mL）
丙酮酸含量檢測試劑盒說明書丙酮酸含量計算圖示： 
注釋：V 樣：反應(yīng)體系中加入待測樣本的體積，75 μL=0.075 mL；V 提：待測樣本總體積，1 mL；
V 液：液體樣本的體積，0.1 mL；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量：
以萬計。
丙酮酸含量檢測試劑盒說明書注意事項 ①血液樣本抗凝劑建議使用肝素鈉-氟化鈉，抗凝血樣品置于冰浴中送檢，盡快分離血漿。 ②若 ΔA 測定超出標(biāo)準(zhǔn)線性吸光范圍，建議適當(dāng)增加樣本（低于標(biāo)準(zhǔn)下限）或適當(dāng)稀釋（高于標(biāo)
準(zhǔn)上限）后再進行測定，計算時相應(yīng)修改。
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